仪器品牌：Biorad

仪器型号：QX200

仪器简介：

QX200数字PCR仪是目前最先进的核酸定量技术，数字PCR也是目前核酸分子检测中最灵敏、最先进的检测分析平台，根据泊松分布原理将整个反应体系制备成数以万计的独立的纳升级微滴内，每一个微滴就是一个稳定的PCR基因扩增体系，然后对每个微滴的荧光信号进行收集，有扩增的记为“1”，无阳性扩增的记为“0”，通过泊松分布对试验结果进行浓度的绝对计算。

基本功能：

数字PCR可将反应体系制备成上万个微滴，将极大的降低高背景分子对低丰度靶标分子扩增的影响，结果分析采用终点法，提高反应体系对复杂样本中抑制剂的耐受度，主要用于下述研究：1. miRNA/lncRNA/DNA甲基化绝对定量分析；2. 无需标准曲线的绝对定量分析；3. 稀有突变/核酸检测，可以检测到10万分之一的稀有事件；4. 复杂样本中靶标分子的检测，最低检测复杂样本中低至1个拷贝的核酸分子；5. 表达量改变≤10%的的基因检测；6. 动植物转基因拷贝数变异检测；7. 单细胞核酸分子检测；8. 高抑制剂的土壤、植物样本核酸分子检测。

主要技术参数：

1. 一次性可制备微滴数目20000个；

2. 兼容荧光染料法/荧光探针法；

3. 一次性最多可检测96个样本；

4. 无需标准曲线直接得到靶标分析的浓度；

5. 对于引物和探针可进行8个温度梯度优化；

6. 可直接使用RNA进行试验；

7. 一次性可进行4个靶标基因检测。

送样要求：

1. RNA或反转录的cDNA样本，样本cq值＞28；

2. DNA样本需进行限制性内切酶酶切，总量不超过100000个拷贝；

3. 自带引物和探针，荧光染料法引物工作浓度100nM，探针法引物浓度900nM探针浓度250nM。